顱腦脊髓損傷自由落體打擊器制作損傷模型操作流程
顱腦脊髓損傷自由落體打擊器制作損傷模型操作流程
創傷性腦損傷(TBI)是指由于外部機械力的作用導致大腦的損傷,臨床發病率逐年上升。為了更好的研究這些問題的發病機制,了解顱腦外傷病理生理過程,并制定出新的治療方法,建立良好的動物模型顯得至關重要。
按自制改良的自由落體方法制作大鼠重型顱腦損傷模型。
自由落體方法:由腦立體定位儀、固定架、帶孔的光滑不銹鋼導管、下落砝碼、撞擊針、擋片組成,使用時擋片插入一定高度的不銹鋼導管內,放入砝碼,撞擊針置于硬腦膜上,迅速拔出擋片,砝碼以自由落體的速度撞擊撞擊頭,后者直接打擊硬腦膜,造成顱腦損傷模型。以下為自由落體打擊器部分配件
撞擊針(不同體型的鼠選相對應型號的撞擊針)
砝碼(不同體型的鼠選用相對重量的砝碼)
自由落體支架(可選配)
脊髓打擊適配器(固定鼠的脊髓)
接下來是操作流程
選用250-300g雄性SD大鼠,造模前禁食8-12h;大鼠經稱重,用10%水合氯醛麻醉(0.3ml/100g)或者條件足夠可以用氣體麻醉進行吸入式麻醉,降低大鼠的死亡率同時保證實驗的成功率。用剃毛刀理去大鼠頭頂的毛發,進行備皮,碘伏常規消毒后,于矢狀正中切開頭皮,長約3-4cm。
剝開軟組織,剝離骨外膜,暴露左側頂骨,在冠狀縫后3mm,中線旁左2.5mm處(此定位可進行調節),用高速顱骨鉆鉆1個小孔,并擴大為直徑5mm的骨窗,暴露蛛網膜并保持硬腦膜完整。
將撞擊針置于硬腦膜外,此時不放砝碼,向上調節撞針2-3mm,使得用40g 砝碼從20cm高處沿導管呈自由落體沖擊于撞擊針時(將擋片突然抽出),可以使得壓縮深度是2-3mm,不打穿硬腦膜,造成局部腦挫裂傷,致使沖擊力為800g/cm(40g×20cm),打擊后,立即從致傷位置解除,以免二次損傷,逐層縫合頭皮,用止血鉗夾一下縫合的傷口,酒精棉球擦拭,取下耳桿、大鼠,肌肉注射青霉素抗感染,把動物放回飼養籠內,術后注意保溫。
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